*TÉCNICAS MACROSCÓPICAS COPROPARASITOSCOPICAS “TAMIZADO”

SEP                      SEM                        DGETI

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial y de Servicios No. 199

PRACTICA

TÉCNICAS MACROSCÓPICAS COPROPARASITOSCOPICAS “TAMIZADO””

ALUMNO: VÍCTOR MANUEL MERA ÁLVAREZ

3º DM LAB CLÍNICO

DR. VICENTE MARTÍNEZ FRAGOSO

OBJETIVO

Aprender a realizar la técnica de tamizado con el fin de localizar parasitos en heces fecales, todo ello enfocado en el aprendizaje de helmintos que hemos estado estudiando durante las clases pasadas.

FUNDAMENTO

La técnica de tamizado permite observar directamente las característicasmorfológicas de los parásitos adultos, enteros o fraccionados. tal es el caso de loshelmintos.

Después de la expulsión espontánea de proglótidos, estos se puedenrecuperar por medio de la técnica de TAMIZADO en heces expulsadas durante 24horas. En caso de obtenerse proglótidos, deben comprimirse entre dosportaobjetos y observarlos a contraluz o en un microscopio.

Mediante el TAMIZADO de las heces también es posible recuperar el escólex, sobre todo después de los tratamientos, el cual se observará bajo el microscopio para determinar sus características morfológicas.

MATERIAL:

·         Coladera de tamiz fino

·         Abatelenguas

·         Caja petri

·         Pinzas

SUSTANCIAS:

·         Muestra de heces fecales

·         Solución salina

PROCEDIMIENTO

1)    Colocar pequeñas cantidades de materia fecal en la coladera con ayuda del abatelenguas.

2)    Dispersar la muestra  con el abatelenguas y agregarle agua hasta lograr un tamizado lo más limpio posibles.

3)    Revisar cuidadosamente  las partículas de las heces que hayan quedado en la coladera.

4)    Los parásitos encontrados colocarlos en una caja petri con solución salina

5)    Se identifica la parte del parasito o el parasito completo

6)    Se reporta el género y la especie del parasito o parte del parasito.

RESULTADOS

Desafortunadamente en este caso no logramos identificar un parasito de los que hasta el momento hemos estudiado, únicamente a la ora de pasar el tamiz de la coladera a la caja petri con solución salina observamos fibras de comida que no se digirió por completo, principalmente de chile y  jitomate, así como las semillas de los mismos. Aun así tomamos una muestra de lo que nos pareció propicio para analizar al microscopio y los resultados son los siguientes.

                                                   Restos de comida no digerida

                                                   Posibles proglotidos segmentados.

                                                      Fibras de comida no digerida

CONCLUSIÓN

 Tal vez no se pudo observar de manera directa algún parasito pero lo positivo de esto es que se aprendió una nueva técnica coproparasitocopica rápida y a la vez muy fácil de hacer, la cual nos permite identificar helmintos posiblemente contenidos en la materia fecal de los pacientes.

Fuentes consultadas:

www.scribd.com/.../MANUAL-DE-LABORATORIO-DE-PARASITOLOGIA

 

“METODO DE CONCENTRACION POR FLOTACION DE WILLIS”

S.E.M.S                           DGETI

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial y de Servicios No. 199

PRACTICA 6

“METODO DE CONCENTRACION POR FLOTACION DE WILLIS”

ALUMNO: VÍCTOR MANUEL MERA ÁLVAREZ

3º DM LAB CLÍNICO

DR. VICENTE MARTÍNEZ FRAGOSO

 “METODO DE CONCENTRACION POR FLOTACION DE WILLIS”

INTRODUCCION:

En este método se utiliza solución saturada de cloruro de sodio para preparar la materia fecal, que como ya sabemos contiene los huevos y quistes de protozoarios y helmintos. Estos al tener un peso específico menor a la solución saturada de cloruro de sodio suben y se adhieren a un cubreobjetos que se encuentra en contacto con la superficie del líquido.

OBJETIVO:

Observar los quistes y huevecillos del frotis realizado con el Método de Willis.

De peso liviano.

MATERIAL:                                                 REACTIVOS:

-Vaso de precipitado.                             –Sol. Saturada de NaCl.

-Embudo.                                                –Sol. De yodo-lugol.

-Gasa.

-Tuvo de ensaye.

-Portaobjetos.

-Cubreobjetos.

PROCEDIMIENTO:

1.-En un vaso de precipitado colocar 10 ml. de sol. Saturada de cloruro de sodio y mezclar  aproximadamente  1 gr. de heces fecales

2.-Filtrar la mezcla con la gasa colocada en el embudo, pasando el líquido a un tubo de ensaye y llenándolo por completo.

3.-Colocar el cubreobjetos sobre el tubo, de manera que tenga contacto con el líquido, esperar de 5 a 10 min.

4.-Colocar una gota de yodo lugol en el portaobjetos. Retirar el cubreobjetos del tubo (con mucho cuidado para no tener pérdidas del material) y ponerlo sobre el portaobjetos.

5.-Observar la muestra al microscopio con el objetivo de 10x. Y si se observa algo interesante cambiar a objetivo 40x.

RESULTADOS:

Las siguientes son imágenes de lo que se observo en diferentes muestras:

            En el campo de las 6 se observo un quiste de hentamoeba histolytica, aunque por    la definición de la imagen no se distingue muy bien.

                                      En otra muestra observada, se localizaron gotas de grasa.

Conclusión:

Al final de la práctica considero muy fácil de realizar, además con este  podemos  encontrar los huevos nematodos que son los parásitos humanos más comunes y son muy frecuentes en las regiones tropicales y subtropicales con condiciones precarias higiénicas.

Este método se basa en que los huevos y quistes de peso especifico menor que la solución saturada de cloruro de sodio que tiene una densidad de 1200 y por ello permiten la flotación de los huevos y quistes mas ligeros que el medio por lo que no pueden subir parásitos mas pesados

Referencias:

http://www.buenastareas.com/ensayos/Metodo-De-Willis/40633.html

http://usuarios.multimania.es/paraelsa/manual04/practica-6.htm

http://personal.us.es/cariza/web/para/practicas/cuadernos/analisis-coprologico-parasitario.pdf

http://www.slideshare.net/monik2010/practica-2-tecnicas-coproparasitologicas

TÉCNICA DE STOLL

S.E.M.S                                               DGETI

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial y de Servicios No. 199

PRACTICA 7

“TÉCNICA DE STOLL”

FECHA DE REALIZACIÓN:

ALUMNO: VÍCTOR MANUEL MERA ÁLVAREZ

3º DM LAB CLÍNICO

DR. VICENTE MARTÍNEZ FRAGOSO

OBJETIVO:

Aprender mediante esta técnica a realizar una observación de materia fecal y después de haber localizado un cierto parasito, determinara la intensidad de la infestación, mediante un conteo de los mismos.

FUNDAMENTO:

Por lo general la sintomatología de las enfermedades parasitarias se relaciona en gran medida con el número de parásitos dentro del huésped. Se tienen registradas algunas de las eliminaciones diarias de huevecillos de varias especies de helmintos y con ello se establecen cálculos con los que se define la posible intensidad de las patologías. Sobre los resultados  influyen algunos aspectos  como la dieta, la mala digestión, los ciclos de producción de los huevos así como la consistencia de las heces.

Para manifestar  al paciente un buen resultado es conveniente realizar conteos de muestras de heces fecales recolectadas en diferentes días y de manera continua para así poder establecer un parámetro o promedio diario de liberación de huevos.

MATERIAL:                                                       

·         Aplicador                                                             

·         Tubos cónicos de 15 ml

·         Pipeta y propipeta

·         Porta y cubreobjetos

SUSTANCIAS

·         Hidróxido de sodio 0.1 N

·         Cuentas de vidrio

Ø  Con ayuda de un aplicador se agrega una pequeña cantidad de materia fecal hasta elevar a 6 ml.

Ø  Se añaden 10 cuentas de vidrio, se tapa el tubo cónico  y se agita de manera que las heces se disuelvan lo mejor posible. (En algunos caso puede ser necesario que se deje reposar varias horas o bien una noche en refrigeración para que se ablanden)

Ø  <蔄ȝ>Después de que la materia fecal este ya disuelta por completo se agita nuevamente un minuto para después tomar una gota de la suspensión y colocarla en un portaobjetos con su respectivo cubre.

Ø  Observar al microscopio (el conteo se hace con el objetivo 40x para mayor claridad)

OBSERVACIONES:

En las siguientes imágenes se muestran los resultados aunque por  obvio solo son de lo que se logra observar en un campo con ello se aclara que no son el resultado de un conteo.

en la imagen anterior se puede observar una fibra vejetal y algo parecido a un huevo, en forma circular

CONCLUSIONES

Aunque no se realizo un verdadero conteo, puedo comentar que la realización de la practica además de no ser tan complicada de realizar es interesante por tener un objetivo diferente a las anteriores, ya que como se menciono es una técnica cuantitativa. Aun así su realización puede ser como un complemento de aquellas en las que su finalidad era cualitativa.

Aunque como se dijo no se realizo un conteo, a continuacion se muestran las formulas para realizarlo, factores y demas cosas para poder obtener un numero de huevecillos en cierto volumen de materia fecal.

Calculo:

1.- La disolución fecal original es de 1 en 15 (4ml/60ml). Como se contaron los huevos en un volumen total de 0.15 ml, el número  total de  éstos en 1ml de heces se encuentran al multiplicar la cuenta total por 100 (1/5 x 0.15 x 100=1).

2.- Suponiendo que el promedio de una persona rebasa los 100 g de heces por día, es posible calcular el número de huevos por día  multiplicando  el resultado por 100 ( o la cuenta de la suspensión original por 10000).

3.- Para determinar el número de parásitos hembras presentes, se divide el número diario de huevecillos que hay en las heces entre el número promedio de

hembra de la especie Necator: 7000 huevos/día

hembra de la especie Ascaris:  200000 huevos /día

hembra de la especie Trichuris: 7500 huevo/día

4.- Se encuentra la cantidad total de parásitos al multiplicar por dos resultado encontrado en el paso tres, ya que se supone que en cualquier infestación  hay un parásito macho por cada parásito hembra.

5.- Algunos técnicos creen que se deben utilizar los factores de correlación de la consistencia de las heces para obtener resultados más exactos. Para esto, se debe multiplicar el número que se obtiene en el paso uno por el factor apropiado. Heces formadas= 1, blandas formadas=1.5, blandas diarreicas=3, fluidas diarreicas=4, muy líquidas=5.

FUENTES DE INFORMACION:

DIAGNOSTICO PARASITOLOGICO DE NEMATODES, “TENNICA STOLL”

CONSULTADO EN usuarios.multimania.es/paraelsa/manual04/practica-8.htm

EL DIA SABADO 1 DE OCTUBRE 12:15 PM

MÉTODO DE CONCENTRACIÓN-FLOTACIÓN DE FAUST

S.E.M.S                                               DGETI

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLÓGICO Industrial y de Servicios No. 199

PRACTICA 3

“MÉTODO DE CONCENTRACIÓN-FLOTACIÓN DE FAUST”

ALUMNO: VÍCTOR MANUEL MERA ÁLVAREZ

3º DM LAB CLÍNICO

FECHA DE REALIZACION:  jueves 8 de septiembre 2011

DR. VICENTE MARTÍNEZ FRAGOSO

Fundamento:

Este método se utiliza solución de Zn, cuya densidad especifica es de 1.180 (33%), que conforma un medio de densidad más alta que la de los huevos: necátor 1.055, tricocéfalo 1.150. áscaris fértil 1.110 y facilita que los huevos  livianos de estos helmintos, con menor peso especifico que la solución, se concentren y floten.

La concentración adecuada aconsejada es la que usa como reactivo una solución acuosa de sulfato de Zn al 33% con una densidad al 1.180.  El agua utilizada diluye y lava la materia fecal. El filtrado con gasa doblada, evita que los detritos gruesos traspasen las paredes, la centrifugación enriquece en delgada película la superficie del líquido  centrifugado con los huevos livianos de algunos helmintos.                                          

Material                                                                 Sustancias:                                                                                                                   

Ø  Porta y cubreobjetos                                        Solución acuosa de sulfato de Zn

Ø  Gasas                                                               Lugol                                                     

Ø  Tubos de ensaye                                              Agua destilada

Ø  Sol. Acuosa de sulfato de Zn    

Ø  Embudo

Ø  Asa de platino

Ø  Centrifuga

Técnica:

1)    Mezclar bien una porción me materia fecal para preparar una superficie en 10 partes de agua destilada.

2)    Filtrar la suspensión a través de una gasa doblada en cuatro, sobre un tubo de ensaye, ayudándose con un embudo pequeño.  

3)    Centrifugar el filtrado a 2500 rpm por 1 min.

4)    Decantar  el líquido sobrenadante  y completar con agua destilada hasta igualar la medida anterior, centrifugar nuevamente. Re suspender el sedimento.

5)    Repetir el procedimiento 2 veces hasta que el líquido sobrenadante esté listo.

6)    Decantar nuevamente el líquido sobrenadante, remplazarlo por igual cantidad de solución de Zn al 33%. Mezclar bien la solución con el sedimento. Centrifugar durante 1 minuto a 1500 rpm.

7)    Tomar 3-4 gotas de las partículas que flotan en la superficie del líquido. Colocarlos en un porta-objetos y mezclarla con 1-2 gotas de lugol, colocar cubre-objeto.

8)    Examinar al microscopio y reportar los resultados.

Método indicado para el diagnostico de huevos livianos de helmintos (necátor, tricocéfalos, áscaris H. nana)               

OBSERVACIONES:

Durante la realización de la practica todo salió correctamente, esto se debe a que anteriormente se había realizado la práctica, pero en este caso se  tiene un objetivo mas, identificar el tipo de microorganismo dentro de las muestras, es decir que más adelante observaremos los resultados obtenidos, mediante fotografías tomadas y cada una de ellas con una pequeña descripción de que es lo que se encontró.

Entre otras cosas al momento de realizar la práctica la muestra de heces presento una apariencia endeble y un color café, así mismo a la hora de centrifugar se presento demasiado sedimento.

Evidencias:

De cierta forma cada una de las imágenes colocadas en los pasos anteriores sirve como evidencia, pero preferí colocar hasta el final únicamente las imágenes de lo que se observo y así mismo con ayuda de comparaciones en libros, poder escribir de qué se trata cada una de ellas.

SE OBSERVAN: Fibras musculares no digeridas y Cristales de ácidos grasos

COMENTARIOS:

Únicamente me gustaría hacer mención sobre lo fácil que puede parecer hacer esta práctica, claro si se le toma interés, pero hay algo que si considero no precisamente difícil si no como algo que requiere de mucha más concentración, “el análisis de las muestras”, ya que de este depende el posible resultado a ofrecer al paciente, es por ello que recomendaría practicar mas para que así todo lo podamos hacer completamente bien.